Información general

Autores

Arbelaiz Cossío A. (Presentador) (1), Azkargorta M. (2), Krawczyk M. (3), Santos-Laso A. (1), Lapitz Dambolenea A. (1), Perugorria Montiel M.J. (1), Erice Azparren O. (1), González E. (4), Jiménez-Aguero R. (5), Lacasta Muñoa A. (6), Ibarra Pónce de León C. (7), Sánchez Campos A. (8), Jimeno J. (9), Frank Lammert F. (3), Milkiewicz P. (10), Marzioni M. (11), Patel T. (12), Gores G.J. (13), Martínez I. (14), Elortza F. (2), Falcón-Pérez J.M. (4), Bujanda L. (15), Bañales J.M. (1)
(1) Hospital Universitario Donostia. Servicio de Enfermedades hepáticas
(2) CIC bioGUNE. Servicio de Plataforma de proteómica
(3) Saarland University Medical Center. Servicio de Medicina
(4) CIC bioGUNE. Servicio de Metabolómica
(5) Hospital Universitario Donostia. Servicio de Cirugía general y digestiva
(6) Hospital Universitario Donostia. Servicio de Oncología
(7) Hospital Universitario de Cruces. Servicio de Digestivo
(8) Hospital Universitario de Cruces. Servicio de Anestesia
(9) Complejo Universitario de Navarra. Servicio de Digestivo
(10) Surgery, Medical University of Warsaw. Servicio de Cirugía general y digestiva
(11) Università Politecnica delle Marche. Servicio de Departamento de Gastroenterología
(12) Clínica Mayo. Servicio de Biología Oncológica
(13) Clínica Mayo. Servicio de Gastroenterología y hepatología
(14) OWL metabolomics. Servicio de Metabolómica
(15) Hospital Universitario Donostia. Servicio de Digestivo

Introducción

El colangiocarcinoma (CCA) incluye un conjunto heterogéneo de tumores que afectan a las células de los conductos biliares (colangiocitos) y que presentan muy mal pronóstico. Existen varios factores de riesgo que predisponen a su desarrollo, incluyendo la presencia de colangitis esclerosante primaria (PSC). En la actualidad no existen biomarcadores no invasivos sensibles y específicos para su diagnóstico precoz. Además, el diagnóstico diferencial del CCA intrahepático y HCC por métodos no invasivos es, en ocasiones, difícil. Las vesículas extracelulares (EVs) han surgido recientemente como importantes herramientas en la búsqueda de biomarcadores y como reguladores de la patogenia de enfermedades.

Material

Se aislaron EVs de suero de pacientes con CCA (n=43), PSC (n=30), HCC (n=29) e individuos sanos (n=32), así como de colangiocitos humanos normales (NHC) y células de CCA humano in vitro. Las EVs fueron caracterizadas mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM), nanoparticle tracking analysis (NTA) e immunoblot. El proteoma de las EVs se determinó mediante espectrometría de masas.

Resultados

Las EVs de suero de pacientes con PSC, CCA, HCC o control presentaron morfología redondeada (TEM), diámetro en torno a 180 nm (NTA) y marcadores proteicos de EVs tales como CD9, CD63 y CD81 (immmunobot). El análisis proteómico de EVs reveló proteínas diferencialmente expresadas entre los distintos grupos experimentales. Algunas de estas proteínas presentaron valores diagnósticos de área debajo de la curva ROC (AUC) de 0,878 para CCA vs control, 0,905 para CCA temprano (estadios I-II) vs control, 0,789 para PSC vs control, 0,806 para PSC no cirrótico vs control, 0,796 para CCA vs PSC, 0,956 para CCA temprano (estadios I-II) vs PSC, 0.904 para HCC vs control y 0,894 para CCA intrahepático vs HCC. In vitro, las EVs derivadas de células de CCA presentaron un enriquecimiento de proteínas oncogénicas en comparación con NHC. Finalmente, EVs de suero de ratones inmunodeficientes con implantes orto-tópicos de células de CCA humano mostraron la presencia de proteínas humanas.

Conclusiones

Los pacientes con PSC, CCA y HCC presentan perfiles proteicos diferenciales en EVs de suero con potential valor diagnóstico. Las EVs derivadas de células de CCA contienen un enriquecimiento de proteínas oncogénicas que pueden tener un papel en la progresión tumoral.